Metasztatikus rákos cid


Daganatok és áttétek, Metasztatikus rákos cid

Rendszerbiológia Absztrakt A metasztatikus sejt-elhelyezés egy komplex folyamat, amelyet részben az anti-metasztatikus résen található immunsejtekből kiválasztódó diffundálódó faktorok közvetítnek. Jelentést készítünk a szekretomika és a transzkripciós aktivitás CEll aRray TRACER adatainak összekapcsolásáról az immunsejtek és a metasztatikus sejtek funkcionális paracrin kölcsönhatásainak azonosítása érdekében, mint új házsegítők.

Metasztatikus emlőrákos egérmodelleket alkalmaztak beteg splenocita kondicionált közeg D-SCM előállítására, amely immunsejtek által szekretált faktorokat tartalmaz. Az MDA-MB áttétes sejtaktivitása, beleértve a sejtek invázióját, migrációját, transzendoteliális migrációját és proliferációját, növekedett a D-SCM-ben a kontroll tápközeghez viszonyítva. D-SCM szekretom-elemzésünk szekretált faktor jelöltből származik, amelyek hozzájárulnak a megnövekedett metasztatikus sejt aktivitáshoz.

A homing funkcionális mediátorait MetaCore szoftver segítségével azonosítottuk az immunsejt sekretome és a TRACER által azonosított aktív transzkripciós faktorok közötti kölcsönhatások meghatározására metasztatikus sejtekben. Az azonosított öt jelölt homing faktor közül a haptoglobint kiválasztottuk és validáltuk in vitro és in vivo, mint a homing metasztatikus rákos cid mediátorát.

férgek megelőzése terhes gyógyszerekben

Kutatásaink egy új rendszerbiológiai megközelítést mutatnak be a sejtes fenotípushoz kapcsolódó funkcionális jelátviteli tényezők azonosítására, amely lehetővé teszi egy eszköz, amely kiegészíti a proteomika által biztosított nagyléptékű fehérje azonosítását. Bevezetés A rák progressziója során a beteg túlélésének valószínűsége jelentősen csökken az áttétes daganatok kialakulásakor.

Metasztatikus rákos cid,

A metasztázis egy többlépcsős folyamat, amelynek során a keringő tumorsejtek elterjednek az elsődleges daganatból, és távoli szerveket kolonizálnak. A metasztatikus lézió kialakulását megelőzően egy metasztatikus rést képeznek egy metasztatikus rákos cid szervnél, amely aktívan elősegíti az áttétes sejteknek az 1. A fülke kialakulása akkor kezdődik, amikor az elsődleges tumor olyan faktorokat és kemokineket választ ki, amelyek a gyulladásos immunsejteket mobilizálják a célszervhez.

A szervbe történő toborzás után az immunsejtek számos tényezőt választanak ki mind lokálisan, mind távoli módon, ami a keringő daganatsejtek összeillesztését eredményezi az érrendszerből és a nyirokrendszerből 5, 6.

Hasi rák cid

Az előzetes metasztatikus rés növeli a tumorsejt kolonizáció és a túlélés valószínűségét; Ezért stratégiákat lehet alkalmazni a metasztatikus rákos cid sejtek elhelyezéséhez hozzájáruló tényezők hatékony azonosítására és megcélzására a tumorsejtek primitált metasztatikus helyekre történő terjedésének korlátozására. A rést ábrázoló immunsejtek és a tumorsejtek közötti átjárást felvetették, hogy hozzájáruljanak a résbe történő beilleszkedéshez.

Az immunsejtek hatalmas számú jelátviteli molekulát választanak ki, és bár néhány kemokint leírtak a 2, 5, 7, 8, 9 homogén hozzárendelésében résztvevőknek, technikákra van szükség a funkcionálisan szekretált tényezők további azonosításához, amelyek elősegítik a homingot.

A fenotípusos választ mediáló fehérjék hatékony azonosításának szükségessége a jelöltek listájából egyre növekszik a nagy teljesítményű stratégiák, például a proteomika által biztosított képességek miatt. A szekretomikának nevezett proteomika egy speciális alkalmazásában a kezdeti fehérjelistát szűrjük, hogy szűrjük a klasszikus N-terminális szignálfelismerő peptidek vagy az exoszómális felszabadulás 10, 11 révén kiválasztódó tényezőket. A szekretomelemzés számos betegségbiomarkert azonosított, amelyeket mint a papillómákat bekenni emlőrák metasztatikus rákos cid más betegségek kialakulóban lévő terápiájaként fejlesztenek ki A szekomomikai technikák tipikusan több száz jelölt fehérjét katalógusoznak; A sejtek fenotípusa vagy a betegség állapotának változásait közvetítő funkcionális elemek azonosítása a jelöltek százai között hagyományosan kvantitatív, bőség-alapú technikák 13, 14 és előrejelzés-alapú számítási módszerek 15 kombinációjával történik.

A jelöltek körének hatékonyabb szűkítésére és metasztatikus rákos cid specifikus fenotípusokat közvetítő fehérjék azonosítására szolgáló módszertan, például a homingolás, lehetővé tenné a proteomika által nyújtott bővülő lehetőségek kezelését.

  • Hogyan jön létre az áttét?
  • Metasztatikus rákos cid Imre tapasztalatai a torokrákkal, tüdőáttéttel a hpv vakcina felidézi Féregparaziták tipizálása aki felépült a nemi szemölcsökből, hpv elváltozás a nyelven almaecet pinworms.

Ebben metasztatikus rákos cid jelentésben egy új rendszerbiológiai stratégiát alkalmaztunk, amely a szeketomika és a transzkripciós faktor TF aktivitásának számítógépes metszéspontján alapul, hogy azonosítsuk az immunsejtek által szekretált tényezőket, amelyek elősegítik a metasztatikus sejteknek a premetatasztikus réshez történő illesztését. Az MDA-MB emlőrákos sejteket stimuláltuk lépsejtes kondicionált közeggel SCMamely az immunsejtek által szekretált faktorok komplex keverékét tartalmazza, és a metasztatikus sejtaktivitás fenotípusos változásait indukálta.

Sekretomikai megközelítést alkalmazva az immunsejtek szekretómát elemezték a rákos sejtek metasztatikus rákos cid változásainak metasztatikus rákos cid részt vevő szekretált tényezők azonosítása céljából. A két adatkészlet összekapcsolásakor a generált hálózatot, amely az SCM szekretált tényezőket összekapcsolja az aktivált TF-ekkel a TRACER-ben, felhasználtuk olyan funkcionálisan szekretált tényezők azonosítására, amelyek hozzájárulnak a metasztatikus sejt-elrendezéshez.

toxoplazmózis pret

Ami hpv kockázat egyik jelölt szekretált faktorot, a haptoglobint in vitro és in vivo validáltuk annak megerősítésére, hogy szerepet játszik a metasztatikus sejtek homingjában. A szekretom és a TRACER adatok összekapcsolása új megközelítést biztosít a szekretomban található funkcionális fehérjék azonosításához, amelyet a metasztatikus sejtek elhelyezésében résztvevő fehérjék azonosításával validáltak.

Eredmények Az immunsejtek által szekretált faktorok befolyásolják az áttétes folyamatokat az MDA-MB sejtekben Az immunsejtek által szekretált faktorok hatására bekövetkező metasztatikus sejtfolyamatokat többszörös in vitro fenotípusos vizsgálatokkal vizsgáltuk.

A leukocitákat beteg egerek lépéből mellrákos sejtekkel oltva és egészséges egerekből nem mellrákos sejtekkel oltva gyűjtöttük, amelyeket betegnek és egészséges lépnek nevezünk. Metasztatikus rákos cid az immunsejtpopulációk közötti különbségekre, egészséges H-SCM és beteg D-SCM splenocitapopulációkból származó splenocita kondicionált tápközegeket hoztunk létre.

A sejtek vándorlását D-SCM-ben mennyiségileg meghatároztuk, képenként4 ± 11, 1 sejtet vetítve, míg az RPMI-ben képenként8 ± 25, 8 sejtet vettem fel. A D-SCM-ben termesztett sejtek proliferációs sebessége megnőtt, a 3. A D-SCM együttesen növelte a metasztatikus aktivitást azaz a metasztázishoz kapcsolódó sejtfolyamatok az összes vizsgált vizsgálatban, összehasonlítva a H-SCM és a kondicionálatlan tápközeg kontrollokkal.

A mindkét táptalajban azonosított protein közül fehérjét ontológiailag azonosítottak szekretált faktorokként 2A. Ebből a szekretált faktorkészletből a D-SCM-ben lévő 23 fehérje és a H-SCM-ben lévő 16 fehérje log2-szeres változása 1, 5-nél nagyobb volt, jelezve a mintában a megnövekedett metasztatikus rákos cid 2B. Ábra, 1. A mindkét táptalajban azonosított szekretált faktor mellett a kizárólag D-SCM-ben jelen levő fehérjéből et azonosítottak és bekerítették a szekretált faktorok listájába, így az összesen szekretált tényezőt hozták létre a D-SCM-ben kiegészítő táblázat 1.

A zöld színű árnyékolt régió jelzi a kiválasztott tényezőket, ha a log-szoros változás nagyobb, mint 1, 5 a D-SCM-ben, és a piros árnyékolt régió jelzi a kiválasztott tényezőket, amikor a log-szoros változás 1, 5-nél nagyobb a H-SCM-ben. A naplózási különbségeket és metasztatikus metasztatikus rákos cid cid értékeket az egyes összehasonlításokhoz az 1.

  • Metasztatikus rákos cid Te meddig akarsz élni?
  • A CC - használata ebben a kutatásban vizsgálati jellegű.

Az 52 TF riporter konstrukció tranzaktivációs profilját 8 órás időtartam alatt a D-SCM-ben tenyésztett sejtek TF aktivitásának mérésével határoztuk papillomavírus vagy mycosis 2. A k- eszközök klaszterezésével a TF aktivitási profilokat 7 klaszterbe csoportosítottuk, és a TF-k hasonló időbeli aktiválással nyerték fel a 8 órás időszakot 3A. Ábra, kiegészítő 3. A 7 klasztert a legtöbbtől a legkevésbé aktívig soroltuk, lehetővé téve a TF-klaszterek megjelenítését, amelyek a D-SCM által szekretált tényezőkre reagálnak metasztatikus rákos cid 3B.

A riporter-aktiválás legnagyobb növekedését mutató klaszter 10 TF-t tartalmazott áttétes sejtfolyamatokban, ideértve a migrációt, a proliferációt és az inváziót 2. Először 47 olyan TF-t azonosítottak, amelyek a D-SCM által kiválasztott tényezőtől lefelé fordultak el olyan nyilvános adatforrások felhasználásával, amelyek kísérletileg igazoltak interakciókat.

A MetaCore hálózati elemző szoftvert D-SCM által szekretált faktorból, az összes ismert humán receptorból és az összes ismert emberi TF-ből álló hálózat létrehozására használtuk csomópontként. Megállapítottuk, hogy a nagymértékben aktivált TF-klaszter szignifikánsan gazdagodott azokkal a TF-ekkel, amelyek várhatóan elválasztott tényezőtől lejjebb vannak. A hálózat TF-ket tartalmaz egy kölcsönhatással. A szekretált tényezőt, 35 szignifikánsan aktív TF-t és a MetaCore-tól kapott összes ismert humán receptor metasztatikus rákos cid csomópontokként összekapcsolták, hogy hálózatot hozzunk létre, amely összekapcsolja a szekretomika metasztatikus rákos cid a TRACER eredményeinket metasztatikus rákos cid.

A csomópontok közötti szegélyek kísérletileg igazolt protein-protein vagy gén-gén kölcsönhatásokat képviselnek. Ezenkívül a kezdeti receptort és a TF csomópontokat magcsomópontként használták, és egy fokkal kibővítették, hogy további jelző komponenseket tartalmazzanak.

A végső hálózat ismert interakcióból állt. A 6 közös TF-célpont előrejelzése szerint kölcsönhatásba lépnek olyan receptorokkal, amelyekről ismert, hogy reagálnak a hálózatban azonosított 5 szekretált faktorra calgranulin A, calgranulin B, haptoglobin, hem-kötő protein és myeloperoxidase 4C.

Ábra, 3. A TRACER-rel a hálózatba beépített TF listájának szűkítésével objektíven azonosíthatjuk azokat a szekretált tényező jelölteket, amelyeknek a hálózatra downstream hatása van.

A haptoglobint szekretált faktorként azonosítják, amely in vitro tumorsejtek toborzódását közvetíti Az 5 jelölt által kiválasztott faktor közül endometrium rák fiatal nő haptoglobint választottuk validálásra. A létrehozott hálózatban a haptoglobin kölcsönhatásba lép a CCR2 receptorral, és több lefelé irányuló TF-t aktivál 3.

Ezen eredmények alapján az rHp eltérő hatást mutatott a metasztatikus sejtfenotípusra, jelezve, hogy a kondicionált táptalaj más tényezői járulnak hozzá a metasztatikus rákos cid hatásokhoz.

A TF riporterek, amelyek mind az rHp fokozott aktivitását, mind a csökkent HpAb aktivitást mutatják, font jelzéssel vannak jelölve.

Metasztatikus rákos cid. Hogyan jön létre az áttét?

A 16 TF riporter tranzaktivációs profilját 8 órás időtartam alatt meghatározzuk kiegészítő 6. A haptoglobint felszabadító tumorsejteket in vivo felszabadító implantált biológiai anyagú állványok A haptoglobin tumorsejtek toborzásának képességét metasztatikus emlőrák orthotopikus modelljében tesztelték A poli laktid-ko-glikolid -ból PLG álló réteges biológiai anyagú állványt alkalmazták a metasztatikus rákos cid helyi leadására az implantátumból.

Az állvány egy liofilizált rHp-t tartalmazó PLG mikrorészecskék csomagolt belső rétegéből áll, mikroporózus külső réteggel. Az állvány keresztmetszetének pásztázó elektronmikroszkópos képei feltárják a belső réteg és az erősen porózus külső réteg sűrű mikroszerkezetét 6A, B ábra.

Az állványokat ezt követően implantáltuk az NSG nőstény egerek intraperitoneális zsírlemezébe, egy tdTomato-jelzett sejtvonallal, amely az MDA-MB sejtekből származik, és amelyeket az emlős zsírlemezbe szállítunk.

Az áttétes sejtek homingját közvetítő immunsejt faktorok titkos azonosítása

Egy hét elteltével az állványokat letisztítottuk, és a sejteket összegyűjtöttük áramlási citometriás elemzés céljából 6C. A haptoglobin nélküli PLG állványok 13, 1 ± 1, 7 daganatsejtet toboroztak az implantátum helyére.

papilloma vírus méhnyakrák

Az rHp hozzáadásával az állvány belső rétegéhez a tumorsejtek toborzódása az állványhoz szignifikánsan nőtt, 25, 3 ± 3, 1 sejtre állványonként 6D ábra. Ezek az eredmények azt jelzik, hogy a haptoglobin hozzájárul a metastatikus sejteknek az állványhoz történő hozzárendeléséhez.

Az állványt megtisztítottuk, és a sejteket összegyűjtöttük áramlási citometria céljából. Az 50 fecskendőkép használatának engedélyét a Nature Publishing Group cégtől szereztük be.

Teljes méretű kép Vita Leírunk egy multidiszciplináris technikát a paracrin jelátvitel kulcsfontosságú közvetítőinek azonosítására, amelyet alkalmaztunk az immunsejtek és az áttétes rákos sejtek közötti kölcsönhatásokban. A mediátorjelöltek azonosítása után megközelítésünket a jelölt tényező alkalmazásával validáltuk, hogy javítsuk a metasztatikus sejteknek a biológiai anyag implantátumba történő in vivo hozzárendelését.

A korábbi vizsgálatok azonosítottak olyan szekretált tényezőket, amelyek elősegítik a daganatsejtek premetasztázisos niche-hez méreganyagok c mi visszatérését, ideértve metasztatikus rákos cid 4, 9-es gyulladásos citokineket, az ECM-et átalakító fehérjéket 18, 19 és a tumorral társított faktorokat 7.

A metasztázishoz hozzájáruló utak azonosítása nagyrészt a génexpressziós profilozási technológiák felhasználására támaszkodott 20, A korábbi jelentések az elsődleges emlőrákos sejtek 22, a sztróma sejtek 14 és az osteoblasztok szekretom analíziseit írják le, és nagy fehérjekatalógusokat azonosítanak, amelyek hozzájárulhatnak a rákos sejtek elrendezéséhez és metasztatikus rákos cid.

3 hónapot jósolt az orvosa – Így gyógyult meg áttétes rákbetegségéből, Metasztatikus rákos cid

A transzkriptikai és a szekretomikus technikák azonban az RNS transzkriptumok és a szekretált fehérjék relatív mennyiségét mérik, és nem feltétlenül korrelálnak a funkcionális paracrin válaszokkal. Rendszerbiológiai technikát alkalmaztunk arra, hogy összekapcsoljuk a szekretált faktorok relatív előfordulását az áramlás utáni celluláris aktivitással, és azonosítsuk az paracrin jelátvitel miatti funkcionális kölcsönhatásokat. Új módszerbiológiai megközelítésünk, amellyel összekapcsoljuk a szekretikai adatokat a TRACER funkcionális TF-aktivitási adataival, lehetővé teszi a jelölt tényezők szűkítését az paracrin jelátvitelben részt vevő funkcionálisan szekretált protein jelöltek azonosításához.

Azokat a sejttípusokat tükröző immunsejteket, amelyek tumorsejteket toborzanak a premetasztázisos niche-be, felhasználtuk a funkcionálisan szekretált faktorok 17, 24, 25 keverékét tartalmazó D-SCM metasztatikus rákos cid. Patológiás állapotokban, például metasztázisban, az MDSC differenciálódása érett granulocitákká azaz makrofágokká és dendritikus sejtekké részlegesen gátolva van, lehetővé téve ezzel a differenciálatlan MDSC-k terjedését és az érett granulocitapopulációk modulálását a lépben Megfigyeltük az MDA-MB fenotípusos változásait, például az inváziót, a migrációt, a transzendoteliális migrációt és a proliferációt az immunsejtek által metasztatikus rákos cid faktorok hatására.

A tápközegek szekomómiai elemzése olyan jelölt tényezőt azonosított, amelyek közvetítik a fenotípusos változásokat, és ezt a listát lerövidítették az aktivált TF-ek meghatározása révén a sejtekben.

A TRACER lehetővé tette az immunsejtek és a metasztatikus sejtek közötti paracrin jelátvitel széles körű értékelését, és a szekretikumok összekapcsolása a TF aktivitási adatkészletekkel lehetővé tette a metasztatikus sejtek elhelyezésével kapcsolatos funkcionálisan szekretált tényezők metasztatikus rákos cid rákos cid.

Az immunsejtek és az áttétes sejtek közötti, funkcionális paracrin kölcsönhatásokat a stratégiánk segítségével azonosítottuk, in vitro kísérletileg validáltuk. Eredményeink a haptoglobint azonosították a metasztatikus sejtek toborzásának potenciális mediátorává.